بیان فاکتورهای اصلی نوترکیب EspA-Intiminاز باکتری E. coli O157:H7 در گیاه تنباکو به منظور تولید واکسن خوراکی
محل انتشار: مجله پژوهش های ژنتیک گیاهی، دوره: 1، شماره: 1
سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 335
فایل این مقاله در 18 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
این مقاله در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_PGRLU-1-1_007
تاریخ نمایه سازی: 16 اسفند 1399
چکیده مقاله:
یکی از پاتوژنهای مهم ایجادکننده کولیت هموراژیک و نشانگان همولیتیک اورمیک در انسان باکتری اشرشیاکلی هموراژیک سویه O157H7 میباشد. دامها اصلیترین مخزن این باکتری میباشند. دو فاکتور پروتئینی با اهمیت در کلونیزاسیون باکتری در اپیتلیوم روده EspA و Intimin هستند که باعث ایجاد آسیبهای تخریبی بهواسطه اتصال میگردند. این پروتئینها توسط جزایر بیماریزایی LEE (Locus of Enterocyte Effacement) کد میشوند. EspA بخشی از سیستم ترشحی نوع III می-باشد که موجب انتقال پروتئین Tir به سلول میزبان و ورود آن به غشا سلول میشود. اینتیمین توسط ژن eae کد شده و به Tir متصل میگردد. این تحقیق بر این اساس است که ژن کایمریک و نوترکیب EI شامل EspA و Intimin که بهواسطه یک لینکر به یکدیگر اتصال یافتهاند میتواند بهعنوان کاندیدای ایمنیزایی خوراکی در نظر گرفته شود و موجب کاهش کلونیزاسیون O157:H E. coli در مدل حیوانی گردد. بدین منظور ژن سنتتیک EspA (120) و Intimin (282) که توسط توالی 4(EAAAK) به یکدیگر متصل شده بود ساخته شد. ژن ساختهشده بر اساس کدونهای گیاه توتون بهینهسازی و سپس تحت کنترل پروموتر Camv35s در ناقل بیانی گیاه کلون و پس از آن بهواسطه انتقال توسط آگروباکتریوم به گیاه توتون منتقل گردید. ورود ساختار ژنی نوترکیب در برگهای گیاه توتون توسط آزمون PCR تأیید شد. در مرحله بعد بیان ژن مورد نظر به روش RT-PCR بررسی و تأیید گردید. در نهایت میزان پروتئین EI در برگهای توتون تراریخته توسط روش الیزا تخمین زده شد که برابر با 1/0 درصد از کل پروتئین محلول در برگ گیاه بود.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
مهدیه ساشورپور
Former M.Sc. Student, Department of Plant Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology, Tehran
جعفر امانی
Assistant Professor, Applied Microbiology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran
مهیات جعفری
Former M.Sc. Student, Department of Plant Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology, Tehran
علی هاتف سلمانیان
Associate Professor, Department of Plant Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology, Tehran
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :