بررسی مقایسهای شناسایی شیگلا فلکسنری از طریق روش رنگسنجی بر پایه نانوذرات طلا و الکتروفورز

مقدمه: شیگلا باسیل گرممنفی رودهای است که عفونتهای ناشی از آن مشکلات جدی را در کشورهای پیشرفته و در حال توسعه ایجاد کرده است. هدف از این مطالعه، بهکارگیری روش رنگسنجی بر پایه نانوذرات طلا جهت تشخیص سریع شیگلا فلکسنری با استفاده از محصول تکثیریافته ژن ipaH   است. مواد و روشها: در این مطالعه برای شناسایی جنس شیگلا از یک جفت آغازگر اختصاصی برای تکثیر ژن ipaH بهروش واکنش زنجیرهای پلیمراز استفاده شد. سپس از پروب تکرشتهای، جهت اتصال به نواحی اختصاصی محصول این واکنش استفاده شد. در مرحله بعد نانوذرات طلا به مخلوط واکنش افزوده شدند و تغییر رنگ محلول بهصورت چشمی و با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی بررسی شد. جهت بررسی حساسیت این روش، از محصول واکنش زنجیرهای پلیمراز با رقتهای مختلف استفاده شد و نتایج با روش ژل الکتروفورز مقایسه شد. نتایج: هیبریداسیون پروب با محصول تکثیریافته از ژن ipaH باعث تجمع نانوذرات طلا بهشکل شبکهای متصل به هم شد و درنتیجه منجر به تغییر رنگ مخلوط واکنش از قرمز به بنفش شد که این تغییر رنگ نشاندهنده وجود باکتری شیگلا فلکسنری در نمونه بود، درحالیکه هیچ تغییر رنگی در موارد کنترل منفی مشاهده نشد. همچنین تجمع نانوذرات طلا با استفاده از تصویر میکروسکوپ الکترونی روبشی تایید شد. بحث و نتیجهگیری: بهدلیل اختصاصیبودن ژن ipaH  در گونه شیگلا فلکسنری، روش رنگسنجی بر پایه نانوذرات طلا میتواند بهعنوان روشی سریع و کاربردی با حساسیت بالا، برای شناسایی اختصاصی این باکتری در نمونههای بالینی و مواد غذایی استفاده شود. 

کلیدواژه ها:

رنگسنجی ، ژن ipaH ، شیگلا فلکسنری ، نانوذرات طلا