بررسی اثر مهاری miRNA-۲۹۶-۵P، miRNA-۲۰۰c، miRNA۲۰۰b بر بیان PIN۱ و نتایج درمانی در سلول های آلزایمری

بیماری آلزایمر به مرور سبب اختلال در سیستم حافظه و یادگیری می شود به صورت مجموعه ای از علائم شناختی یا رفتاری از جمله کاهش حافظه بروز میکند تحقیقات اخیر نشان گر نقش اساسی پروتئین تائو در بروز این بیماری می باشد دو فرم ایزومری سیس و ترانس این پروتیین در ساختمان میکروتوبولی سلول عصبی وجود دارد که فرم سیس آن به دلایل قرار گیری تحت عامل ایجاد شرایط استرس سلولی و یا ضربات فیزیکی بر نواحی حساس عصبی مغز ایجاد می شود که عامل برهم زنی ساختمان میکروتوبولها در نورون ها شده و پاتولوژیک و سمی شناخته شده است وفرم ترانس آن فیزیلوژیک می باشد. از این رو آنزیم PIN۱ وارد عمل شده و با صرف انرژی سبب هایپر فسفریلاسیون پروتئین تائو و تبدیل ایزومری سیس به ترانس می شود. از آنجایی که miRNA ها نقش مهمی در تنظیم دقیق سطح بیان ژن ایفا می کنند ما فرض کردیم که آنها ممکن است دوز Pin۱ را تنظیم کنند. (۱۳) با این وجود، نقش تنظیمی احتمالی miRNA ها در پیشرفت AD با تنظیم PIN۱ به خوبی مورد مطالعه قرار نگرفته است. هدف ما شناسایی miRNA های بالقوه ای بود که PIN۱ را در AD افزایش می دهند. IPS یا فیبروبلاست افراد الزایمری و افراد سالم را درمحیط کشت کنترل شده به سلول ها و نورون های عصبی تمایز داده شد ،نورون های افراد سالم و الزایمری را در شرایط استرس AGING قرار داده شد. مجموعه ای از miRNAهای کاندید را از دو پایگاه داده آنلاین پیش بینی هدف miRNA، یعنی TargetScan۷.۱و miRWalk۲.۰ استخراج می کنیم پس از طراحی و سفارش پرایمر بهmiR۲۰۰C منظور بررسی بیان بررسی اثر مهاری miR۲۹۶-۵P وmiR۲۰۰b بر بیان pin۱از روشReal-Time PCR استفاده شد.با توجه به تغییرات نموداری و مقایسه آنها متوجه میشویم که miRNA۲۹۶-۵P بیشترین افزایش بیان را داشته است و سپس miRNA۲۰۰c و در نهایت و miRNA۲۰۰B کمترین تغییر افزایشی را به همراه دارد. برااساس مطالعات و شناسایی کانفورمیشن cis به عنوان عامل تایوپاتی و توانایی آنزیم PIN۱ در تبدیل کانفورمیشن cisبه کانفورمیشن trans پروتیین Tau به این نتیجه رسیدیم که در نظر گرفتن عوامل تنظیم کننده بیان و عملکرد Pin۱ از اهمیت حیاتی برخوردار است بنابرین ما در آزمایشگاه و با استفاده از تکنیک Real-Time PCR بیان ۳ miRNA های کاندیدا (miR۲۹۶-۵P ، miR۲۰۰c و miR۲۰۰b) در نمونه های آلزایمری و نمونه سالم سنجیدیم نتایج حاصله نشان از افزایش بیان هر۳مورد داد افزایش بیان آنها احتمالا باعث کاهش pin۱ خواهد شد و متعاقبا سبب افزایش کانفورمیشن cis پروتیینTau و تایوپاتی خواهد شد زیرا میزان pin۱ و کانفورمیشن cis پروتیینTau با هم رابطه عکس دارند لذا میتوان با افزایش بیان pin۱ با استفاده از آنتاگومیرها تایوپاتی و مقدار cis Tauرا کاهش داد و از پیشرفت بیماری جلوگیری کرد ، این مطالعه میتواند دریچه ای برای استفاده از آنتگومیرها در مدل های سلول آلزایمر برای بررسی نتایج درمانی احتمالی آن باشند.

کلیدواژه ها:

آلزایمر ، آنزیم PIN۱ ، تایوپاتی ، سیسستایوسیس ، miR۲۰۰c ، miR۲۰۰b ، miRNA۲۹۶-۵P