بررسی اثر سرب بر رشد سلول های استئوبلاست مهره ستون فقرات جنین انسان و بیان ژن bax در محیط کشت

زمینه و هدف: بافت استخوان مرکز عمده تجمع سرب محسوب شده و به عنوان یکی از اهداف اصلی سمیت این فلز سنگین مطرح است. در مطالعه حاضر ما اثر سرب را بر رشد سلول های کشت اولیه ستون مهره جنین انسان و بیان پروتئین Bax بررسی کردیم. مواد و روش ها: نوع مطالعه حاضر آزمایشگاهی است. به این منظور ابتدا کشت اولیه از سلول های ستون مهره جنین انسان پس از هضم آنزیمی بافت تهیه شد و میزان حضور سلول های استئوبلاست در کشت با بررسی آنزیم آلکالین فسفاتاز تعیین گردید. سپس اثر مجاورت با رقت های ده میکرومول تا ۵/۱ میلی مول سرب بر تکثیر سلول در محیط کشت حاوی ۵ و ۱۰% سرم جنین گاوی  (Fetal Bovine Serum, FBS)با روش سنجش MTT (Methyl Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide) بررسی شد. در ادامه، اثر ۱/۰ میکرومول سرب، بر بیان ژن bax، با روش ایمونوسیتوشیمی بررسی شد. یافته ها: درصد سلول های استئوبلاست در کشت اولیه با بررسی آنزیم آلکالین فسفاتاز، ۸۰ تا ۸۵% تعیین شد. رقت های ۱۰۰ تا ۱۵۰۰ میکرومول سرب تکثیر سلول را در محیط کشت حاوی ۱۰%، ۴۰ تا ۸۱% افزایش داد و بیشترین تحریک رشد در رقت یک میلی مول مشاهده شد (۰۰۱/۰p<). هم زمان با کاهشFBS ، فعالیت های مهاری و تکثیری سرب افزایش یافت، به ترتیبی که در رقت های بین ۱۰ تا ۱۰۰۰ میکرومول رشد سلول بین ۱۵ تا ۱۰۳% افزایش یافت، و در رقت ۵/۱ میلی مول، ۷۲% کاهش رشد مشاهده شد (۰۱/۰p<). بیشترین تحریک تکثیر سلول در رقت ۵۰۰ میکرومول اعمال شد (۰۰۱/۰p<). نتیجه گیری: مجاورت سلول ها با یک دهم میکرومول سرب، افزایش پروتئین Bax را در سیتوپلاسم سلول نسبت به کشت کنترل به دنبال داشت. نتایج این مطالعه، احتمال اختلال در عملکرد فیزیولوژیک طبیعی بافت استخوان به وسیله سرب را مطرح می کند. واژه های کلیدی: استات سرب، استئو بلاست، Bax، MTT assay

کلیدواژه ها:

استات سرب ، استئو بلاست ، Bax ، MTT assay