مقایسه تعداد اسپرم های زنده در نمونه های انسانی با استفاده از سه روش؛ تورم هیپواسموتیک، V/C Assay و ائوزین- نیگروزین: یک مطالعه آزمایشگاهی

چکیده   زمینه و هدف: تعداد اسپرم های زنده در نمونه سمن ( Semen ) یکی از شاخص هایی است که در بررسی علل ناباروری بایستی مورد توجه قرار گیرد. بسته به شرایط و امکانات هر آزمایشگاه، به ویژه اهداف تشخیصی یا درمانی، یک یا چند روش به کار گرفته می شود . در این مطالعه سه روش HOST ، VCA و ENT از لحاظ هزینه و امکانات مورد نیاز ، دقت تشخیص و زمان لازم جهت انجام این آزمایشات به منظور تعیین ارجحیت نسبت به یکدیگر مقایسه شده اند.   مواد و روش ها: در این مطالعه آزمایشگاهی، ۶ نمونه سمن از داوطلبین سالم مراجعه کننده به آزمایشگاه آندرولوژی بیمارستان هلم شایر انگلستان در سال ۱۳۸۳ مورد بررسی قرار گرفت. از هر نمونه سمن با استفاده از روش Percoll gradien ، ۱ میلی لیتر سوسپانسیون از اسپرم با غلظت ۱۰۶×۵ اسپرم بر میلی گرم تهیه شد. در ۴ اپندورف ،۱۸۰ میکرولیتر از سوسپانسیون ریخته شد. به ۳ اپندورف حاوی سوسپانسیون فوق، ۱/۰ میکروگرم بر میلی لیتر از لیپوپلی ساکارید کلامیدیا به حجم ۲۰ میکرلیتر بر میلی لیتر اضافه شد. به اپندورف آخر نیز ۲۰ میکرولیتر بر میلی لیتر از EBSS ×۱ به عنوان کنترل اضافه گردید. اپندورف ها به مدت ۶ ساعت درانکوباتور با دمای ۳۷ درجه سانتی گراد و دی اکسید کربن ۵% نگهداری شدند. میزان حیات و مرگ اسپرم ها با سه روش پیش گفت، با استفاده از آزمون های آماری One-way ANOVA ارزیابی قرار گرفت.   یافته ها: م یزان مرگ اسپرم در مجاورت ۱/۰ میکروگرم بر میلی لیتر از لیپوپلی ساکارید کلامیدیا به طور قابل توجهی افزایش یافت [( Host ، ۱/۴ ± ۵/۳۵%) و ( ENT ۹/۳ ± ۴/۳۴%) و ( VCA ، ۳/۳ ± ۸/۳۳%)، (۰۵/۰ p< )] اما این افزایش در گروه آزمون نسبت به یکدیگر معنی دار نبود.   نتیجه گیری: چنانچه ارزیابی قابلیت حیات اسپرم فقط جنبه تشخیصی داشته باشد، تکنیک ائوزین – نیگروزین به عنوان روش برتر پیشنهاد می شود. زیرا روشی ارزان، ساده، سریع، سهل الصول و بدون نیاز به امکانات خاص می باشد.   واژه های کلیدی: اسپرم، قابلیت حیات، سمیت سلولی ، تورم هیپواسموتیک، ائوزین- نیگروزین

کلیدواژه ها:

Sperm ، Viability ، Cytotoxicity ، Hypo-Osmotic Swelling ، Eosin-Nigrosin ، اسپرم ، قابلیت حیات ، سمیت سلولی ، تورم هیپواسموتیک ، ائوزین- نیگروزین