بیان پروتئین نوترکیب IpaD-STxB و بررسی ایمنی زایی آن در موش سوری

سابقه و هدف: باکتری شیگلا، شایع ترین عامل اسهال بوده و تاکنون واکسن موثری علیه آن یافت نشده است. پروتئین IpaD و انتروتوکسین شیگلا یاB subunit of Shiga toxin (STxB) نقش مهمی در تهاجم، بیماری زایی و ایجاد عفونت توسط شیگلا دارد. برای بررسی ایمنی زایی هر یک از پروتئین های ممزوج IpaD و STxB می توان از دو مدل حیوانی موش و خوکچه هندی استفاده نمود و نقش هر یک از پروتئین های نوترکیب IpaD-STxB را در تهیه واکسن مناسب مشخص نمود. مواد و روش ها: مطالعه حاضر از نوع مطالعه تجربی می باشد که در آن اطلاعات مربوط به توالی ژنی ipaD وstxB از بانک ژنی استخراج و به صورت صناعی تهیه شد. این ژن به درون باکتری coli BL۲۱ DE۳ E. منتقل و پروتئین مورد نظر توسط باکتری تولید شد. میزان بیان پروتئین نوترکیب مورد ارزیابی و با استفاده از تکنیک لکه گذاری وسترن، تایید شد. پروتئین نوترکیب با استفاده از ستون کروماتوگرافی، تخلیص و در چهار نوبت متوالی به موش سوری تزریق شد. از تزریق دوم (یادآور اول) به بعد، یک هفته پس از انجام تزریق، خون گیری انجام و مورد آزمایش الایزا قرار گرفت. یافته ها: نتایج حاکی از افزایش محسوس تیتر آنتی بادی علیه پروتئین IpaD-STxB در موش بود. ایمنی زایی آن با استفاده از سم فعال O۱۵۷:H۷ E. coli مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که موش های ایمن شده توانستند ۵/۷ برابر LD۵۰ شیگا توکسین E. coli O۱۵۷:H۷ را تحمل نمایند. استنتاج: پروتئین حاصل از ترکیب ژن های ipaD وstxB می تواند موش سوری را نسبت به شیگا توکسین مصون نماید. در نتیجه، پروتئین STxB در مدل حیوانی موش سوری موجب ایمنی زایی شده و پروتئین نوترکیب تولید شده می تواند کاندیدای مناسبی جهت تولید واکسن نوترکیب علیه انواع شیگلا باشد.

کلیدواژه ها:

Shigella dysenteriae type ۱ ، Shiga toxin B-subunit (STxB) ، IpaD protein ، E. coli O۱۵۷: H۷ ، شیگلا دیسانتری تیپ ۱ ، زیر واحد B سم شیگا (STxB) ، پروتئین IpaD ، E. coli O۱۵۷:H۷