شناسایی، جداسازی و همسانه سازی ژن سیتوکروم p۴۵۰ از آویشن باغی
محل انتشار: زیست فناوری گیاهان دارویی، دوره: 5، شماره: 2
سال انتشار: 1398
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 53
فایل این مقاله در 11 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JMPBZ-5-2_002
تاریخ نمایه سازی: 27 آبان 1402
چکیده مقاله:
تیمول یکی از پرکاربردترین متابولیت ثانویه درگیاه آویشن (Thymus vulgaris L.) بعنوان دارو میباشد. یکی از ژن هایکلیدی که در سنتز آن نقش دارد ژن سیتوکرومp۴۵۰ است. به منظور جداسازی و همسانه سازی آن ابتدا استخراج RNA انجام شد و پس از ساخت cDNA با استفاده از آغازگرهای طراحی شده از مناطق حفاظت شده در حضور آنزیم HF که خاصیت ′ ۳ به ′۵ اگزونوکلئازی دارد عمل تکثیر صورت گرفت. در مرحله اول، همسانه سازی به روش T/A کلونینگ در پلاسمید pTG۱۹ صورت گرفت. انتخاب نوترکیب ها از طریق سیستم PCR کلونی و هضم آنزیمی با BamHI انجام شد. قطعات همسانه شده برای تایید نهایی توالی یابی شدند. به منظور همسانه سازی در وکتور بیانی pBI۱۲۱GUS-۹ قطعه برش خورده با آنزیم BamHI در سایت همولوگ در وکتور pBI۱۲۱GUS-۹تحت پروموتر ۳۵s و خاتمه دهنده Nos همسانه شد. تایید کلونیهای نوترکیب با PCR کلونی و هضم آنزیمی انجام شد. وکتور نوترکیب گیاهی طراحی شده میتواند جهت پژوهشهای بعدی به منظور فرا بیان تیمول مورد استفاده قرار گیرد.
نویسندگان
مهسا محمدی
Student of MSc. Of Biotechnology, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran
مسعود توحیدفر
Department of Plant Biotechnology, Faculty of science and biotechnology, Shahid Beheshti University, G. C. Tehran, Iran