طراحی و ساخت پلاسمید نوترکیب pBI-HG-CSF حامل فاکتور محرکه کلنی گرانولوسیت انسانی برای تراریزش گیاهان

فاکتور محرکه کلنی گرانولوسیت انسانی ( HG-CSF=Human Granulocyte-Colony Stimulating Factor) یکی از فاکتورهای رشد خونساز است که تکثیر و تمایز سلولهای پیش ساز گرانولوسیت نوترو فیلی و تشکیل کلنی نوتروفیلی سلولهای مغز استخوان را تحریک می کند . ژن Hg-csf در منوسیتها و ماکروفاژهای انسانی نظیر کارسینومای حفره دهانی CHU-2 و کارسینومای مثانه 5367 بیان م ی شود. به منظور تهیه پلاسمید بیانی حاوی ژن Hg-csf ابتدا قطعه 538bp که در ناقل همسانه سازی pBluescriptIISK(+) کلون گردیده بود با دو آنزیم HindIII و BamHI هضم و سپس در مکان HindIII و BamHI اپران LacZ ناقل همسانه ساز pGEM7Zf(-) همسانه سازی شد . و ژن Hg-csf الحاق شده متعاقبا با دوآنزیم XbaI و SacI هضم ودر مکان هومولوگ در وکتور باینری pBI121 متصل شد. و تظاهر ژن تحت کنترل مستقیم پیشبر CaMV35S ویروس موزائیک کلم قرار گرفت. این حامل پلاسمیدی نوترکیب را می توان در انتقال ژن به گیاهان با استفاده از اگروباکتریوم و نیز سایر روش های انتقال ژن نظیر تفنگ ژنی نیز مورد استفاده قرار داد.

کلیدواژه ها:

ا Hg-csf ، وکتور نوترکیب pBI121-Hg-csf و فاکتور محرکه کلنی گرانولوسیت انسان