اثر استرادیول 17 - بتا بر بیان ژن آنزیم های استروژنیک و پروژستاژنیک در سلول های گرانولوزا گاوی در شرایط برون تنی

هدف از مطالعه حاضر بررسی تاثیر استرادیول 17 -بتا بر بیان نسبی ژنهای گیرنده FSH) FSHR ،)گیرنده LH) LHR)و آنزیمهای استروژنیک و پروژستاژنیک )Progestagenic )در سلولهای گرانولوزای کشت داده شده گاو هلشتاین بود. بهطور خالصه، فولیکولهای دو تا پنج میلیمتری از تخمدان گاوهای بالغ از کشتارگاه جمعآوری شدند، پس از جدا کردن سلولهای گرانولوزا در محیط F12/DMEM به مدت شش روز در در پلیتهایی 24 تایی کشت داده شدند و بهمنظور شمارش تعداد سلولها از رنگ تریپان بلو 4/0 درصد استفاده شد. تیمارها شامل 1 )500 هزار سلول گرانولوزا درml 500 محیط کشت، 2 )500 هزار سلول گرانولوزا در ml200 محیط کشت، 3 )500 هزار سلول گرانولوزا در ml 500 محیط کشت و استرادیول 17 -بتا و 4 )500 هزار سلول گرانولوزا در ml200 محیط کشت و استرادیول 17 -بتا بودند. برای اندازهگیری استرادیول 17 -بتا محیطهای کشت در روز شش جمعآوری شدند بر اساس روش رادیوایمونواسی )RIA ،)غلظت استرادیول 17 -بتا اندازهگیری شد. سلولها بوسیله ترایزول جمعآوری شدند و تا زمان استخراج RNA در 80 -درجه سانتیگراد نگهداری شدند. دادهها با استفاده از نرمافزار JMP مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نتایج نشان داد افزودن استرادیول 17 -بتا به محیط کشت سلولهای گرانولوزای گاو، از یک سو با افزایش بیان ژن آنزیمهای کلیدی در تبدیل اندروژن به استرادیول 17 -بتا )آنزیمهای استروژنیک( غلظت استرادیول 17 -بتا تولید شده بهوسیله سلولهای گرانولوزا را افزایش داد. از سوی دیگر مسیر ساخت پرژوسترون را با کاهش بیان ژن آنزیمهای کلیدی در تبدیل کلسترول به پروژسترون )آنزیمهای پروژستاژنیک( مهار کرد و در نهایت سبب کاهش لوتئینه شدن و بهبود سالمت فولیکول شد.

کلیدواژه ها:

سلول گرانولوزا ، استرادیول17 -بتا ، کشت سلول ، بیان ژن ، گاو