شناسایی نمونه های ساپرولگنیا جداسازی شده از هچری تاس ماهی ایرانی (Acipencer persicus) بر اساس خصوصیات فیزیولوژی و مولکولی

هدف: تاس ماهی ایرانی مهمترین تاس ماهی بومی سواحل جنوبی دریای خزر است که هرساله برای بازسازی ذخایر آن در مرکز تکثیر ماهیان شهید رجایی به صورت مصنوعی تکثیر می شود. لیکن هر ساله 50-35% تخم این ماهی در اثر ابتلا به عفونت های قارچی از بین می رود و اطلاعات دقیقی در مورد عوامل قارچی آبزی عامل تلفات تخم این ماهی در دسترس نبوده است . در این بررسی نمونه های ساپرولگنیا با توجه به سرعت رشد، ایجاد زئواسپور متوالی ، مقاومت حرارتی و ساختار مولکولی که با روش RAPD-PCR و با استفاده از DNA استاندارد انجام شد، مورد شناسایی قرار گرفته اند. مواد و روش کار: تعداد 150 عدد تخم آلوده به قارچ از هچری جمع آوری و برای جداسازی قارچ از آن ها بر روی محیط PG کشت تهیه گردید. پس از خالص سازی، 21 نمونه خالص به دست آمد. برای تعیین سرعت رشد، مقاومت حرارتی و تولید زئواسپور متوالی نمونه ها در محیط PG آگار و براث کشت و در دو حرارت 18 و 12 سانتی گراد طی 10-5 روز گرمخانه گذاری شدند. DNA نمونه های خالص سپس با استفاده از روش فنل کلروفرم استخراج و آزمایش RAPD-PCR با استفاده از 5 پرایمر و دوDNA استاندارد parasitica Saprolegnia وSaprolegnia diclina انجام شد. نتایج و بحث : بر اساس آزمایشات RAPD-PCR نمونه ها به چهار گروه تقسیم شدند. درگروه اول که بزرگترین گروه بود، ضریب شباهت بیش از 90% بود. در این گروه نمونه S.parasitica قرار داشت .گروه بزرگ بعدی گروه 3 بود با ضریب شباهت بیش از 90% که نمونه S.diclina در آن قرار داشت . با توجه به ضریب شباهت در بین اعضای هر گروه نمونه های هم گروه با هر نمونه استاندارد، همان نمونه شناسایی شد. یعنی اعضاء گروه 1 و 3 به ترتیب S.parasitica و S.diclina شناسایی شدند. دو گروه دیگر(گروه 2 و 4)نیز به عنوان Saprolegnia sp شناسایی شدند. هیچ یک از نمونه ها در حرارت 12 درجه سانتیگراد رشد نکردند. بیشترین میزان تولید زئواسپور متوالی مربوط به گروه 1 بود. در گروه 2 این قابلیت مشاهده نشد. در دو گروه 2 و 4 این قابلیت به شدت کمتری مشاهده شد. لازم به ذکر است که سرعت رشد نمونه ها با یکدیگر تفاوت معنی داری نداشت و از الگوی ژنتیکی بدست آمده پیروی نکرد که احتمالا به خاطر آن است که پرایمرهای مورد استفاده ژن های مربوط به این خصوصیت را پشتیبانی نکرده است .

کلیدواژه ها:

ساپرولگنیا ، تاس ماهی ایرانی ، خصوصیات فیزیولوژی و مولکولی